Wnt5a与 Syndecan-1在小鼠脓毒症致急性肺损伤中的表达研究
齐颖,李真玉,王斌,陈兵
天津,天津医科大学第二医院 ICU
The expression and significance of Wnt5a and Syndecan-1 in sepsis-induced acute lung injury of mice
QI Yin, LI Zhen-Yu, WANG Bing, CHEN Bing
摘要 目的 研究 Wnt5a及 Syndecan-1的表达在脓毒症致急性肺损伤(ALI)模型中的作用 。方法 制备脓毒症致 ALI动物模型,小鼠随机分为 ALI组和对照组。小鼠按时间点分为 1、3、5、8、12、24 h,每组 8 只,研究血清 Wnt5a 及 Syndecan-1 浓度、血管通透性及肺组织病理的改变。ALI组腹腔注射大肠杆菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS),对照组注射等体积生理盐水,取血保留上清备用,采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清 Wnt5a及Syndecan-1的浓度;小鼠左肺组织进行 HE 染色,右肺上叶进行匀浆提取蛋白,Western blot 检测 Wnt5a 蛋白的表达;右肺下叶进行组织 mRNA的提取,并进行逆转录及 Real-time PCR观察 Syndecan-1基因的表达水平;尾静脉注射伊文思蓝(Evans blue, EB)观察肺血管渗透性;透射电镜下观察右中叶肺组织的血管内皮细胞结构改变。结果 ALI组的肺组织肺泡壁增厚,血细胞及炎性细胞大量渗出;随着肺损伤程度加重,血清 Wnt5a及 Syndecan-1浓度逐渐升高,分别在 5 h及 3 h达峰值,在 24 h内维持较高浓度;Wnt5a蛋白表达水平随肺损伤程度加重而表达增加,Syndecan-1 mRNA在 3 h开始表达上调;甲酰胺中伊文思蓝的浓度随肺损伤程度加重逐渐升高,与对照组比较,电镜下观察到肺血管内皮细胞肿胀显著,细胞内空泡增加,部分细胞内线粒体肿胀,细胞间距增宽,基膜与内皮细胞分离。结论 肺脏血管内皮损伤发生在 ALI早期,血清 Wnt5a与 Syndecan-1浓度改变与肺损伤严重程度一致,二者作为ALI的早期生物学标志物为临床液体管理提供一定指导作用。
关键词 :
Wnt5a ,
多配体蛋白聚糖(Syndecan-1) ,
脂多糖(LPS) ,
脓毒症 ,
急性肺损伤(ALI) ,
液体管理
收稿日期: 2016-06-21
基金资助: 天津市卫生和计划生育委员会科技基金项目(2014KZ103)
通讯作者:
陈兵 tisheng2008@163.com
作者简介 : 齐颖(1985-),女,硕士研究生,住院医师,E-mail:sumo2777@sina.com。
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